冷冻技术运用于辅助生殖领域,一般有精子冷冻、卵子冷冻和胚胎冷冻,储存温度为零下196度。
1.精子冷冻
根据精子的来源可分为捐精冷冻和自精子冷冻。捐精冷冻后,可以建立人类精子库,为男性无精或其他原因不能提供自身精子进行受孕的夫妻提供精子,已达到妊娠的要求。自体精子冷冻一般是因为工作或其他原因(如取精困难,放疗化疗用药前)需要在女性取卵前将精子冷冻,以后根据需要再进行解冻。
2.卵子冷冻
根据卵子的成熟度可分为成熟卵子冷冻和未成熟卵子冷冻。卵子冷冻可有效保持女性生育力。如因身体(癌症患者)或工作等原因还不适合要宝宝,可以先将卵子冷冻保存起来,使卵子保持在年轻的时刻,以便将来的宝宝更健康。
3.胚胎冷冻
即把胚胎放到液氮中作冷冻储存,从而使胚胎处于休眠状态。技术上选择液氮主要是由于其温度恒定,且价格经济、技术亦成熟。因为应用了促排卵技术,患者通常能够得到多枚质优胚胎,因而冷冻剩余的胚胎,以备患者需要时复苏移植。通常选择冷冻D3的卵裂期胚胎和D5/D6的囊胚,胚胎冷冻技术也为PGD/PGS提供了可能和便利。冷冻胚胎的复苏率一般在90%以上,种植率在8%~30%,累计妊娠率超过60%。
玻璃化冷冻法
玻璃化冷冻法的基本原理是用冷冻液替代细胞内的水份,使冷冻过程中不会产生冰晶,以减少冰晶形成对细胞的损伤。冷冻液在超低温环境下使细胞呈玻璃化状态,所以称玻璃化冷冻。以目前的技术,玻璃化冷冻的胚胎,解冻后存活率稳定在95%以上。
新闻速递
知名学术期刊《柳叶刀》发表了一篇题为"体外受精冷冻单个囊胚移植与新鲜单囊胚移植的比较"的最新文章,揭示了冷冻单胚移植可以显著提高胚胎的着床率,为单囊胚移植策略提供了极具价值的循证依据。
这项成果是由山东大学陈子江教授团队完成的又一项全国多中心前瞻性随机对照临床研究,是关于"全胚冷冻策略"的又一重大突破。前两项研究于2016年和2018年已发表于医学顶级期刊《新英格兰医学杂志》。
相关研究
关键词:玻璃化冷冻 卵裂期胚胎 囊胚
保定市妇幼保健院生殖中心曾开展玻璃化冷冻法的临床研究,旨在分析使用玻璃化冷冻法对人D3卵裂期细胞及囊胚进行冷冻,对胚胎发育潜能的影响。
中心从2013年3月至2015年12月选取了358枚胚胎进行解冻胚胎移植,将胚胎分为卵裂组及囊胚组,统计解冻后的存活率,移植后着床率、妊娠率、流产率及多胎妊娠率。
研究者采用自然周期法或激素替代法准备子宫内膜,从而开展胚胎移植。
自然周期法为在月经第10天开始超声检测卵泡及内膜发育,当卵泡直径>14mm时,监测LH,血LH峰后96小时或排卵后72小时进行复苏胚胎移植。
激素替代法为在月经第3天起口服补佳乐2~8mg/d,B超检测子宫内膜,当子宫内膜厚度>8mm且为三线征、雌二醇>100pg/mL时肌肉注射黄体酮,每天肌注40~l00mg,于黄体酮注射的第3或5天行胚胎移植。
结果显示,D3卵裂组与囊胚组解冻后存活率没有差异,但移植后在发育潜能方面,卵裂组明显低于囊胚组,即冷冻解冻移植囊胚期胚胎更具发育潜能。
卵裂组与囊胚组解冻后有关各项比较表
延申知识点:
囊胚是如何评分的,举例"3AB",参考如下Gardner评分标准。
第一个数字代表发育快慢
1 期: early blastocyst,囊胚腔小于胚胎总体积的1/2;
2 期: blastocyst,囊胚腔大于或等于胚胎总体积的1/2;
3 期: full blastocyst,囊胚腔完全占据了胚胎的总体积;
4 期: expanded blastocyst,囊胚腔完全充满胚胎,胚胎总体积变大,透明带变薄;
5 期: hatching blastocyst,囊胚的一部分从透明带中逸出;
6 期: hatched blastocyst,囊胚全部从透明带中逸出。
第二个字母代表胎儿部分,即内细胞团(inner cell mass)分级
A 级: 细胞数目多,排列紧密;
B 级: 细胞数目少,排列松散;
C 级: 细胞数目很少。
第三个字母代表胎盘部分,即滋养层细胞(trophectoderm)分级
A 级: 滋养细胞层由较多的细胞组成,结构致密;
B 级: 滋养细胞层由不多的细胞组成,结构松散;
C 级: 滋养细胞层由稀疏的细胞组成。
囊胚移植优势
有利于胚胎发育潜能的评估;
囊胚更有利于胚胎着床;
降低宫外孕几率;
减少多胎率情况;
有利于提升PGD/PGS的准确性。
上文部分内容摘自《中国优生与遗传杂志》2016年第24卷第10期《玻璃化冷冻人不同发育时期的胚胎对其发育潜能的影响》一文
特此鸣谢 李澎涛 王娜(保定市妇幼保健院生殖中心)