在前篇《辅助生殖液体类产品质控方法 (一)》中，我们阐述了鼠胚胎培养试验作为辅助生殖液体类产品质控方法之一的基础定义、所需器材和观察指标，今天我们继续探讨该类产品质控的另一重要科目——内毒素检测。
内毒素的化学成分为磷脂多糖-蛋白质复合物，来自革兰氏阴性细菌的细胞壁，故当细菌死亡溶解或用人工方法破坏后，其被释放出来，从而引起发热、微循环障碍、内毒素休克及弥散性血管内凝血等。

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依据《中华人民共和国药典》，我们采用鲎试剂实施内毒素检测，从而判断待测品中内毒素是否符合规定。
该检测包括两种方法，即凝胶法和光度测定法，待测品检测时，可使用其中任何一种方法进行检测，当测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶限度试验结果为准。

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检测原理
凝胶法系通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应的原理来检测内毒素的情况。
光度测定法分浊度法和显色基质法，浊度法系利用鲎试剂与内毒素反应过程中浊度的变化来测定内毒素含量，显色基质法系利用鲎试剂与内毒素反应过程中产生的凝固酶使特定底物释放出呈色团的多寡来测定内毒素含量。

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凝胶法判读规则
待测品与鲎试剂在试管内反应：
若管内形成凝胶、且凝胶不变形、不从管壁滑脱，则视为阳性；
若管内未形成凝胶、或形成的凝胶变形并从管壁滑脱，则视为阴性。
(检测过程中避免试管受到振动从而造成假阴性)

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内毒素限值计算
由公式L=K/M确定，公式中L为待测品的内毒素限值、单位为EU/ml(液体)，K为人每千克体重每小时最大可接受的内毒素剂量，M为人用每千克体重每小时的最大待测品剂量(人均体重按60公斤计算，人体表面积按1.62平方米计算)。

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内毒素检测质控准则
1.内毒素检测用水应符合灭菌注射用水标准，其内毒素含量小于0.015EU/ml(凝胶法)或0.005EU/ml(光度测定法)，且对内毒素检测无干扰作用；
2.内毒素检测用器皿需去除可能存在的外源性内毒素干扰，其中耐热器皿常用干热灭菌法(250度、30分钟以上)去除内毒素，塑料器皿则应选取标明无内毒素且对检测无干扰的；
3.内毒素检测用鲎试剂更换新批号后，应进行鲎试剂灵敏度复核试验(凝胶法)或标准曲线可靠性试验(光度测定法)