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实验室因素对胚胎培养的影响 (二)
在上一篇文章中,我们提到空气质量及氧气浓度对胚胎培养的影响,不仅如此,我们还发现环境因素中的温度也存在影响胚胎发育、甚至导致其异常的可能。这使得我们在完善胚胎培养体系时,也需要将温度这一变量考虑在内。

相关研究已指出过高的温度会对卵子有不良影响,进而影响胚胎的发育。其中最显著的是影响卵母细胞内纺锤体的稳定性。举例,如果温度超过37℃,即使仅仅20分钟,中期卵母细胞的纺锤体便会开始分解,即便在此之后温度重新回到37℃,纺锤体也不能恢复。而纺锤体的改变,对受精率、胚胎发育和临床妊娠率都有不利的影响。

另,人卵泡液内温度低于37℃,具体低约2.3℃,因此理论上我们认为略低的温度(36℃)更接近生殖道温度,亦有利于胚胎发育。但有研究显示在控制培养箱类型、培养箱温度波动、pH值等干扰因素后,37℃培养的胚胎与36℃相比,第三天细胞数更多、囊胚形成率更高、利用率也更高,对此情况,我们有必要对培养箱,这一维持胚胎微环境稳定的重要仪器进行研究。

培养箱
根据气体供应方式不同可分为三气培养箱和普通二氧化碳培养箱两种,根据体积及加热方式的不同又可分为桌面培养箱及大型常规培养箱两种。
研究者比较了不同类型的培养箱,加热方式如下:
MINC台式培养箱(COOK, Australia)的加热方式为直接加热;
FORMA水套式培养箱(Selby, Australia)加热方式为空气对流加热;
一些FORMA培养箱会配套INCUPLATE(CIP-1000,COOK, Australia)装置,可以从培养箱中吸收热量并直接传递。
实操显示
对于MINC培养箱,将50μL的液体从35.0℃复温至37.0℃需要5.5分钟;
对于FORMA培养箱,将50μL的液体从35.0℃复温至36.7℃需要20分钟;
对于加入INCUPLATE的FORMA培养箱,将50μL的液体复温至36.7℃需要9.5分钟。
研究显示
MINC培养箱温度恢复快,优质囊胚形成率高于FORMA组。MINC培养箱中,培养皿和培养仓的温度基本一致,而大培养箱中培养皿和培养仓的温度有较大差异。通过比较MINC培养箱和FORMA培养箱发现,MINC培养箱可以得到更高的受精率、着床率和妊娠率。

另,单独仓室的桌面培养箱可能为胚胎培养提供更稳定的环境,但箱体正常工作需要实验室室温的稳定,室温过低时可能在较短时间内引起培养箱温度的变化,值得警惕。各中心需根据实验室场地及手术量等因素综合考虑,选择合适的培养箱进行胚胎培养。

综上所述,对IVF实验室室温的精确把控及选择相适合的培养箱,可以帮助胚胎更好地培养。

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