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实验室因素对胚胎培养的影响 (三)
在前述两篇文章中,我们阐述了空气质量、氧气浓度、实验室温度对胚胎发育的影响,而作为与胚胎亲密接触的培养液,其pH值和相关成分也会相当程度地影响胚胎的培养。

前篇导读
实验室因素对胚胎培养的影响 (二)
实验室因素对胚胎培养的影响 (一)

培养液pH值
胚胎内部pH值约为7.1~7.2,培养液pH值可以影响细胞pH值。尽管胚胎自身通过调节其内部pH值可在一定的pH值范围内生存,但如果两者偏差大,会给胚胎带来应激。细胞内pH值的变化可能引起胚胎代谢、发育异常甚至死亡,因此应尽量减少pH值波动。
众多动物实验证明,培养液pH的变化可以影响胚胎发育,例如轻微、短时的pH值变化会显著影响仓鼠胚胎的发育。pH值的升高(7.42)或降低(6.87),都会导致卵裂期胚胎内线粒体的重新分布及细胞骨架异常。而这些细胞器能控制染色体的聚集,从而影响胚胎发育。
培养液的pH值主要由其碳酸氢盐含量和二氧化碳浓度共同控制。各大品牌通常有自己的pH值推荐范围且受培养液成分影响,比如乳酸及氨基酸浓度不同,即使液体内pH相同,也可能导致细胞内pH不同。
如上所述,各品牌培养液除pH值推荐范围不同外,其成分及含量各不相同,其中丙酮酸、乳酸及氨基酸三者含量差异明显。而培养液中的特定成分也会影响培养液的储存时间和储存状态,进而影响胚胎发育。举例,添加了蛋白的培养液在2~8℃状态下保存6个星期,氨浓度会从9.2μmol/L上升到99.8μmol/L,然而在没有添加蛋白的培养液中,则没有发现氨浓度积累的现象,故造成这种差异的主因来自培养液成分中的蛋白添加剂,而氨浓度的上升会导致培养液的pH值升高,使得培养液难以长时间储存。
一步式培养液基于“让胚胎自己选择”的理念,针对胚胎发育的全过程仅研发一种培养液;
序贯式培养液则模拟母体内环境,根据输卵管和子宫内液体各种营养成分浓度不同而分别研发了卵裂胚培养液和囊胚培养液。
综上所述,妥善地选择培养液,有助于胚胎在实验室环境下更好地发育。

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